商品介紹
測定意義:
海藻糖是由兩個葡萄糖分子以α,α-1-1 糖苷鍵連接而成的一種非還原雙糖,廣泛存
在于細菌、酵母菌、霉菌、食用菌、低等植物、昆蟲、無脊椎動物和高等植物等多種有機體中。海藻糖的非還原性決定了它對酸、堿、高溫等的穩定性。另外,它本身具有很強的吸水性,使它在生物體內具有抗脫水作用,在逆境條件下可通過識別外界刺激、產生和傳遞信號、基因表達和代謝調節來保護植物免受不良環境的傷害。
植物體內主要以葡萄糖為底物合成海藻糖,該反應首先在海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)的作用下,催化尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)和 6-磷酸葡萄糖反應生成中間產物6-磷酸海藻糖,再在海藻糖-6-磷酸磷酸酶 (trehalose 6-phosphate phosphatase,TPP)的作用下去磷酸化,生成海藻糖。因此,測定TPS活性對于研究植物逆境具有重要意義。
測定原理:
TPS催化UDPG與G6P生成海藻糖-6-磷酸,同時產生UDP;UDP在丙酮酸激酶與乳酸脫氫酶作用下,氧化NADH為NAD+,NADH的下降速率與UDP含量成正比,通過340nm吸光度下降速率反映TPS活性。
需自備的儀器和用品:
酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。